Propagación clonal in vitro de Swietenia macrophylla King (Caoba).
Authors
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Date
2011
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Volume Title
Publisher
Quevedo : UTEQ
Abstract
La presente investigación se la realizó en el Laboratorio de Biotecnología, situado en
los predios centrales del Campus Manuel Haz Alvares de la Universidad Técnica
Estatal de Quevedo, ubicado en la Av. Quito en el Km 1.5 en la vía Quevedo- Santo
Domingo de los Tsáchilas.
La cual consistió en establecer un ensayo para estandarizar un protocolo para la
propagación y desarrollo in vitro de Swietenia macrophylla King (caoba), se aislaron
yemas apicales de caoba las cuales se segmentaron en partes de 1 a 1,5 cm de
longitud. Las plantas recolectadas tenían 6 meses de edad. Las yemas que se
utilizaron fueron de tres semanas de edad, previamente seleccionadas por sus
características fenológicas. Las cuales antes de la fase de establecimiento fueron
fumigadas en el invernadero con dos tipos de fungicidas (Agrimicin y Benlate), dos
veces por semanas durante todo el ensayo, la aplicación de fungicidas se lo realizo
para disminuir la presencia de hongos fitopatógenos en la fase de invernadero y así
asegurar una mayor sobrevivencia de plantas en el establecimiento del cultivo in vitro.
El diseño experimental empleado fue un en las fases de establecimiento y
multiplicación fue un diseño completamente al azar (DCA) con arreglo factorial 3x2 con
4 repeticiones y 5 observaciones y para la fase de enraizamiento un DCA 4
tratamientos y 4 repeticiones y 5 observaciones por unidad experimental. La obtención
del análisis de varianza y separación de medias al 95% de probabilidad se realizó con
ayuda del programa estadístico MSTAC y para establecer diferencias estadísticas entre
tratamientos se utilizó la Prueba de Rangos Múltiples de Tukey (P≥0,05).
En la fase de establecimientos se probaron diferentes concentraciones de Hipoclorito
de Calcio (10, 15 gr) a diferentes Tiempos (10. 15, 20 min) y fueron evaluados a los 21
días de establecidos los explantes. El mejor promedio se obtuvo en el Tratamiento 6
(15 g de Hipoclorito de Calcio durante 20 min), con 95 % sobrevivencia. En la fase de multiplicación para incrementar la producción de brotes del explante se
utilizaron dos tipos de hormonas la Bencilaminopurina (BAP) y el Acido Indolbutirico
(AIB) en diferentes concentración (1, 2, 3 mg L-1 de BAP y 0.5, 1, mg L-1 de AIB); los
brotes obtenidos durante esta etapa se transfirieron a un medio de cultivo con
reguladores de crecimiento del tipo auxinas, para inducir el enraizamiento de los brotes
con concentraciones diferentes (1, 1.5, 2, 2.5 mg L-1 de AIB).
El tratamiento que mayor estimuló la proliferación de brotes de Caoba fue la
concentración de hormonas que contenía (2 mg L-1 BAP y 1 mg L-1 AIB), donde se
obtuvo un nivel de brotación del 70 %. Mientas que la menor cantidad de brotes se
obtuvo con la concentración (3 mg L-1 BAP y 0,5 mg L-1 AIB), donde se alcanzo
solamente el 40%. En lo que respecta al enraizamiento de los brotes obtenidos durante
la fase de multiplicación, ninguno de las concentraciones utilizadas indujo el
enraizamiento. Cabe resaltar que se recomienda probar nuevos protocolos para la fase
de enraizamiento y de esta manera lograr la proliferación de raíces en esta especie.
Description
This research was performed in the Biotechnology Laboratory, located on the campus's
central campus of Manuel Alvares Make State Technical University Quevedo, located at
Av Quito at Km 1.5 on the way Quevedo-Santo Domingo de los Tsáchilas.
Which was to establish an assay to standardize a protocol for in vitro propagation and
development of Swietenia macrophylla King (mahogany), were isolated apical buds of
mahogany which is segmented into parts 1 to 1.5 cm long. The harvested plants were 6
months old. The buds used were three weeks old, previously selected for their
phenological characteristics. Which before the establishment phase in the greenhouse
were sprayed with two kinds of fungicides (Agrimicin and Benlate), twice a week
throughout the trial, the application of fungicides is what was done to reduce the
presence of fungal pathogens in the phase emissions and thus ensure greater survival
of plants in the establishment of in vitro culture. The experimental design used was in the early stages of establishment and
multiplication was a completely randomized design (CRD) with 3x2 factorial
arrangements with 4 replications and 5 comments and the rooting phase, DCA 4
treatments and 4 replications and 5 observations per unit experimental. Obtaining the
variance and mean separation at 95% probability are performed using the statistical
program MSTAC and to establish statistical differences between treatments were used
Multiple Range Test of Tukey (P ≥ 0.05).
In the establishment phase of testing different concentrations of calcium hypochlorite
(10, 15 g) at different times (10, 15, 20 min) and were evaluated at 21 days of
established explants. The best average obtained in treatment 6 (15 g of calcium
hypochlorite for 20 min) with 95% survival.
In the multiplication phase to increase the production of shoots explant used two types
of hormones of benzylaminopurine (BAP) and indole butyric acid (IBA) at different
concentrations (1, 2, 3 mg L-1 BAP and 0.5, 1 mg L-1 IBA), the shoots obtained during
this stage were transferred to a medium with growth regulators auxin type to induce
rooting of shoots with different concentrations (1, 1.5, 2, 2.5 mg L -1 of IBA).
The treatment increased the shoot proliferation stimulated Mahogany was the
concentration of hormones containing (2 mg L-1 BAP and 1 mg L-1 IBA), which yielded a
level of 70% germination. Tools that the lower number of outbreaks was obtained with
the concentration (3 mg L-1 BAP and 0.5 mg L-1 IBA), which reached only 40%. In
regard to the rooting of shoots obtained during the multiplication phase, none of the
concentrations used induced rooting. Significantly, it is recommended to test new
protocols for rooting phase and thus achieve the proliferation of roots in this species.
Keywords
Propagación clonal, in vitro, Swietenia macrophylla King (Caoba)
Citation
Reyes M., Héctor. (2011). Propagación clonal in vitro de Swietenia macrophylla King (Caoba). 61 p.